电视剧《一马三司令》的主题曲是由雷佳演唱的，名字叫《大义忠魂》。另外，这部电视剧的主题曲、片头曲和片尾曲都是这首《大义忠魂》，这首歌很有特点，配合剧情让观众们听过后心中很有感触。
这部电视剧主要讲述了马氏三兄弟在面对日寇的强行入侵时坚决不当亡国奴，决定组织山中长山中学的学生和当地的老百姓展开斗争的故事。他们和群众们一起拉起了武装，和日寇血战到底，最后为了国家和人民壮烈牺牲，是民族的英雄。
马氏三兄弟刚开始决定发动学生们为了抗日起义的时候，就导致了国民政府长山县教育督导专员的不满，马家还因此遭到了土匪的抢劫，还好二弟马晓云带着护卫队及时赶到，将土匪击退。之后中共山东省委派出了三名共产党员来到村子，准备协助马氏三兄弟完成抗日起义的准备工作。过程虽然十分艰难，但是大家的心并没有因此动摇，反而更加坚定。